ПЦР анализ: что это такое? На какие 12 инфекций сдается? Узнайте больше о методах диагностики

ПЦР – что это такое?

Каждое живое существо на планете, будь то человек, животное или микроб, обладает генами — носителями наследственной информации. Гены представляют собой участки ДНК или РНК с уникальной последовательностью нуклеотидов для каждого организма. ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) и РНК (рибонуклеиновая кислота) формируют длинные молекулы, состоящие из двух спирально закрученных нитей, которые состоят из нуклеотидов, подобно бусинкам на нитке.

Предположим, необходимо выяснить, присутствует ли в биологическом материале пациента ДНК или РНК инфекционного агента или его фрагменты. Как это сделать, если молекулы настолько малы и их немного? Ответ даёт методика ПЦР: она позволяет искусственно увеличить количество вредоносной ДНК или РНК в лабораторных условиях, что упрощает их обнаружение и идентификацию.

Основная идея полимеразной цепной реакции заключается в разделении нитей молекул и попытке «подсадить» к их противоположным концам фрагменты ДНК или РНК возбудителей. Если они подойдут, это будет означать, что искомый микроб найден. Фермент «ДНК-полимераза», добавленный в пробирку, инициирует синтез новых копий нужных участков молекул, которые многократно размножаются и становятся заметными. В дальнейшем мы объясним простыми словами, как проходит этот удивительный процесс и зачем он нужен.

Американский учёный Кэрри Муллис разработал метод ПЦР в 1983 году, а через десять лет, в 1993 году, был удостоен Нобелевской премии по химии за своё открытие. Однако изначально методика имела недостатки и нуждалась в доработках. На сегодняшний день существует более десятка различных видов ПЦР, предназначенных для различных диагностических задач.

Что касается ПЦР-диагностики в режиме реального времени (Real-Time PCR), то влияние человеческого фактора на результаты исследования сведено к минимуму: пробирки помещаются в современное высокотехнологичное оборудование и не открываются на протяжении всех циклов, включая анализ результатов, который также выполняет автоматизированная система. У этого метода есть два основных недостатка: высокая стоимость и ограниченная доступность, так как амплификаторы нового поколения есть не в каждой лаборатории.

[Видео] Наглядная информация – что такое ПЦР и как проходит процесс?

ПЦР анализ, или полимеразная цепная реакция, представляет собой высокоэффективный метод диагностики инфекционных заболеваний. Врачи отмечают, что данный тест позволяет выявлять генетический материал патогенов, что делает его особенно ценным в ранних стадиях заболевания. С помощью ПЦР анализа можно определить наличие 12 различных инфекций, включая вирусы гриппа, COVID-19, герпес, гепатиты, а также бактерии, вызывающие пневмонию и туберкулез. Специалисты подчеркивают, что точность и скорость получения результатов делают ПЦР анализ незаменимым инструментом в современной медицине. Это позволяет врачам своевременно назначать лечение и предотвращать распространение инфекций.

159 ПЦР 12 инфекций

Какие инфекции позволяет выявить мазок на ПЦР?

Вот неполный перечень вредных микроорганизмов, которые можно выявить с помощью ПЦР-анализа:

• Широкое семейство герпес-вирусов, включая цитомегаловирус, вирус варицелла-зостер, вирус Эпштейна-Барра и другие;
• ВИЧ;
• Вирусы гепатита;
• Папилломавирусы;
• Цитомегаловирус;
• Парвовирусы;
• Аденовирусы;
• Риновирусы;
• Пикорнавирусы;
• Рубивирусы;
• Микобактерии, вызывающие туберкулёз;
• Гемофильная палочка;
• Холерный вибрион;
• Бледная трепонема;
• Стафилококки;
• Менингококки;
• Стрептококки;
• Гонококки;
• Легионеллы;
• Шигеллы;
• Сальмонеллы;
• Бруцеллы;
• Клостридии;
• Листерии;
• Боррелии;
• Хеликобактерии;
• Токсоплазмы;
• Микоплазмы;
• Уреаплазмы;
• Хламидии;
• Трихомонады;
• Гарднереллы;
• Кандиды.

Метод ПЦР используется не только в клинической медицине, но и в криминалистике, археологии, экологии, ветеринарии, фармакологии, генной инженерии и производстве продуктов питания — везде, где анализ ДНК может быть полезен.

[Видео] Полимеразная цепная реакция:

Плюсы и минусы ПЦР

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) имеет ряд неоспоримых преимуществ:

• Точность. Ранее используемые в медицине диагностические методы часто основывались на косвенных признаках наличия возбудителей заболеваний, таких как антитела или продукты их жизнедеятельности. ПЦР позволяет точно идентифицировать микроорганизм, обнаруживая его ДНК или РНК. Это дает возможность выбрать наиболее эффективную стратегию лечения.
• Надежность. ПЦР-диагностика значительно превосходит другие методы по этому критерию, достигая почти 100% точности. Если все этапы — от подготовки и забора образца до анализа и интерпретации результатов — выполнены правильно, ошибки исключены. Ложноотрицательный результат возможен лишь при неправильном заборе материала, а ложноположительный — при попадании посторонних веществ в образец на любом этапе исследования.
• Чувствительность. ПЦР-метод уникален тем, что способен обнаружить инфекционного агента даже при наличии одной молекулы его ДНК в пробе. Это открывает новые горизонты для ранней диагностики заболеваний или их предотвращения, если возбудитель еще не успел размножиться в организме. Кроме того, ПЦР позволяет определить вирусную нагрузку, что помогает оценить тяжесть заболевания, вероятность рецидива и риск передачи инфекции другим людям.
• Универсальность. С помощью одного ПЦР-анализа можно проверить наличие нескольких инфекций одновременно. Это особенно важно для заболеваний, передающихся половым путем, которые часто встречаются вместе. Загружая образец биоматериала в амплификатор и добавляя праймеры для нескольких возбудителей, специалист может выявить присутствие каждого из них.
• Скорость. Полный цикл ПЦР-диагностики занимает всего 2-3 часа. Конечно, стоит учитывать загруженность лаборатории и процесс сбора образца, но большинство современных диагностических центров предоставляют результаты анализа в тот же день или на следующий.

Однако у полимеразной цепной реакции есть и некоторые недостатки:

• Высокие требования к чистоте образца. Наличие посторонних примесей в пробе на любом этапе диагностики может привести к ложноположительным результатам. Микробы окружают человека повсюду, и их количество велико.
• Вероятность амплификации ДНК мертвых микроорганизмов. Иногда человек уже перенес инфекцию, но молекулы погибшего возбудителя все еще находятся в организме, и анализ может дать ложноположительный результат.
• Проблемы с неопознанными инфекциями и мутациями. В образце могут оказаться микроорганизмы, для которых еще не разработаны праймеры, или они могут быть, но не включены в реакцию. Кроме того, возбудители инфекций постоянно мутируют, адаптируясь к новым условиям и лекарствам, что делает существующие праймеры менее эффективными.

ПЦР-анализ, или полимеразная цепная реакция, стал важным инструментом в диагностике инфекционных заболеваний. Люди отмечают его высокую точность и скорость получения результатов. Этот метод позволяет выявлять генетический материал патогенов, что делает его особенно эффективным для диагностики различных инфекций. ПЦР-тесты применяются для определения наличия 12 инфекций, включая ВИЧ, гепатиты B и C, туберкулез, сифилис, хламидиоз, гонорею, COVID-19, а также вирусы герпеса и цитомегаловируса. Благодаря своей чувствительности, ПЦР помогает не только в диагностике, но и в мониторинге лечения, что делает его незаменимым в современной медицине.

ПЦР анализ – что это такое

Виды ПЦР

На сегодняшний день в медицине существует более десяти типов полимеразной цепной реакции (ПЦР), включая рекомбиназную, вложенную, инвертированную, ассиметричную, ступенчатую, групп-специфическую, с обратной транскрипцией и с «горячим стартом». Эти методы разработаны для удовлетворения специфических диагностических потребностей. Однако для человека, не знакомого с молекулярной биологией, разобраться в нюансах классификации может быть сложно и не слишком интересно. Намного более актуальны те виды ПЦР, которые активно применяются на практике и предлагаются пациентам. Рассмотрим их подробнее.

ПЦР 12

Комплексный анализ ПЦР 12 по праву занимает лидирующие позиции среди диагностических тестов. Он охватывает 12 наиболее распространенных половых инфекций и включает контрольный тест на качество взятых образцов (КВМ).

Почему этот анализ так востребован? Во-первых, он отражает современные реалии, когда у одного пациента с кожно-венерологическими заболеваниями может быть выявлено несколько инфекций. Во-вторых, лабораториям удобнее использовать готовые картриджи с необходимыми праймерами. В-третьих, для пациентов это более экономичный вариант, так как комплексный анализ стоит дешевле, чем тестирование на каждую инфекцию отдельно.

Как проходит сдача анализа ПЦР 12? У мужчин мазок берется из уретры. Процедура может быть не самой приятной, но она быстрая и переносимая. У женщин анализ берется эпителиальным соскобом из влагалища или с шейки матки, что обычно не вызывает дискомфорта. О правилах подготовки к сдаче анализа можно узнать ниже.

Стандартный набор для анализа ПЦР 12 включает:

• Вирусы герпеса 1 и 2 типов;
• Папилломовирусы 16 и 18 типов (онкогенные);
• Микоплазмы двух видов – человеческая и генитальная;
• Цитомегаловирус;
• Уреаплазма;
• Хламидия;
• Трихомонада;
• Гонококк;
• Кандида.

Тринадцатым элементом в этом списке является КВМ – контроль за правильностью взятия мазка, который осуществляется путем поиска гена HMBS. Этот ген присутствует в эпителиальных клетках, выстилающих уретру. Если мазок берется из другого участка, ищется другой ген. Если в образце обнаруживается 250 и более копий нужного гена, это свидетельствует о корректности взятия анализа ПЦР 12, и его результаты можно считать надежными. Если количество копий специфического гена ниже нормы, рекомендуется пройти повторное обследование, чтобы избежать ложного отрицательного результата. Положительные результаты всегда принимаются за истинные.

Следует отметить, что список инфекций, исследуемых в рамках анализа ПЦР 12, может варьироваться в разных лабораториях. Например, могут быть добавлены дополнительные типы вирусов герпеса или папилломовируса, в таком случае анализ будет называться «ПЦР 13» или «ПЦР 14». В некоторых случаях перечень может быть сокращен до «ПЦР 4» (гонорея, трихомониаз, хламидиоз, микоплазмоз).

Сдача ПЦР на инфекции – рассказывает уролог Алиев С.Н.

ПЦР качественная и ПЦР количественная

У этих двух типов ПЦР-диагностики разные цели. Качественный анализ отвечает на вопрос, присутствует ли у пациента искомый микроорганизм, то есть дает ответ «да» или «нет». Рассмотренный ранее комплекс ПЦР 12 относится именно к этой категории.

Существует также количественный анализ, известный как ПЦР в режиме реального времени. Этот метод основывается на том, что количество новых ампликонов (копий определенного участка ДНК патогена) пропорционально их исходному количеству. Если в пробе изначально содержится много вредных молекул ДНК, то с каждым циклом полимеразной цепной реакции их количество удваивается, и к концу процесса накапливаются миллионы копий. Современные амплификаторы отслеживают изменения в количестве копий и вычисляют приблизительную концентрацию возбудителя в организме пациента.

Зачем это нужно? В случае с бактериями, простейшими или грибками такие данные имеют сомнительную диагностическую ценность, так как численность колоний может изменяться под воздействием различных факторов, и уничтожить такие микроорганизмы относительно просто. Совсем другое дело – вирусы. Это неклеточные формы жизни, которые невозможно уничтожить так же, как антибиотики справляются с бактериями. В борьбе с вирусами человек может полагаться только на свой иммунитет, а возможности противовирусных средств весьма ограничены. Именно в контексте вирусов методика ПЦР в режиме реального времени становится особенно важной.

Вирусная нагрузка или виремия – это степень тяжести поражения организма вирусом. Этот показатель определяется путем подсчета числа вирионов в биологическом материале, измеряется в международных единицах (МЕ) или в количестве копий на 1 мл крови и используется для контроля за ходом терапии и предотвращения распространения вируса.

ПЦР количественная крайне необходима для носителей следующих инфекций:

• Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ);
• Гепатит B и C.

Однако и в случае с другими вирусами определение вирусной нагрузки может быть полезным – например, при цитомегаловирусе, герпесе или папилломавирусе. Анализ поможет понять, угрожает ли человеку новое обострение болезни и насколько высока вероятность передачи инфекции.

Для людей с ВИЧ назначается антиретровирусная терапия. Ее цель – максимально снизить вирусную нагрузку, а в идеале – сделать ее неопределяемой. Но даже в этом случае существует риск передачи инфекции своему половому партнеру или партнерше, поэтому не следует пренебрегать использованием презервативов.

Что сдают на ПЦР-анализ?

При выборе биоматериала для диагностики врачи учитывают особенности инфекции и её места локализации. Это важно, так как наличие вредоносной ДНК в образце влияет на точность результатов анализа.

Для проведения ПЦР используются следующие виды материалов:

• Мазок или эпителиальный соскоб со слизистых оболочек. Это могут быть уретра, влагалище, шейка матки, цервикальный канал, задний проход, а также ротовая, носовая и глазная полости. Мазки особенно актуальны для диагностики инфекций, передающихся половым путём. Для их получения применяются зонды с различными наконечниками.
• Кровь из вены берут для выявления ВИЧ, гепатита, цитомегаловируса, мононуклеоза или заболеваний бактериальной природы, таких как сифилис, холера или боррелиоз.
• Биологические жидкости (моча, слюна, сперма, мокрота, секрет предстательной железы, желудочный сок, плевральная, суставная, спинномозговая или амниотическая жидкость, а также бронхоальвеолярный лаваж) берутся по медицинским показаниям. Например, ПЦР-анализ мокроты применяется для диагностики туберкулёза.
• Пунктаты и биоптаты органов и тканей обычно берутся при подозрении на онкологические заболевания. Исключение составляет биопсия желудка, которая проводится для выявления Helicobacter pylori – бактерии, вызывающей гастрит и язвенную болезнь.

Хранение и транспортировка биоматериалов

Образцы должны быть отправлены в амплификатор не позднее чем через 2 часа после забора, если они хранятся при комнатной температуре. Если по каким-либо причинам ПЦР-анализ нужно отложить, пробирки с биоматериалами можно оставить в холодильнике на срок до одного дня при температуре 2–8°С. Максимальный срок хранения составляет 14 дней, но в этом случае пробы должны быть глубоко заморожены (-20°С). После разморозки их необходимо использовать немедленно; повторное замораживание недопустимо.

В большинстве случаев ПЦР-диагностика осуществляется «в тот же день»: пациент приходит в клинику, где у него берут мазок или кровь, и сразу отправляют биоматериал в лабораторию, поэтому о правилах хранения можно не беспокоиться.

Как подготовиться к ПЦР-диагностике?

Правила достаточно просты:

• Для сдачи мазка или соскоба из половых путей у мужчин и женщин необходимо воздерживаться от сексуальных контактов в течение 72 часов. Перед забором важно провести гигиеническую обработку интимной зоны и не мочиться в течение 2-3 часов. Женщинам не рекомендуется посещать лабораторию во время менструации и сразу после её завершения. Также следует избегать использования средств, которые могут нарушить естественную микрофлору влагалища (например, спринцевания или свечи). Пациенты должны завершить курс антибактериальной терапии (если она проводилась) не позднее чем за 14 дней до ПЦР-анализа.
• Кровь необходимо сдавать из вены утром натощак.
• Мочу и сперму собирают в небольшие стерильные контейнеры, которые можно приобрести в аптеке, если забор будет осуществляться дома. Важно помнить о сроках хранения и транспортировки биоматериалов — не более 2 часов.
• Слюну собирают после 3 часов воздержания от пищи и напитков, допускается только полоскание рта водой. Рекомендуется перед забором немного помассировать область слюнных желез.
• Другие, менее распространенные виды биоматериалов следует собирать только в клинике, где предоставят все необходимые инструкции по подготовке.

Результаты ПЦР-анализа

Ранее мы обсуждали качественную и количественную ПЦР-диагностику. В случае качественного анализа интерпретация результатов проста: ответ может быть только положительным или отрицательным. Если все этапы подготовки, сбора биоматериала, проведения теста и анализа результатов выполнены корректно, можно доверять полученным данным.

Ситуация иная с количественной ПЦР. Здесь результатом является числовое значение, указывающее на вирусную нагрузку. Виремия измеряется в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) или в копиях на миллилитр (копии/мл). Одна международная единица содержит примерно 4 копии вируса, однако точное соотношение лучше уточнить в лаборатории, проводившей анализ, так как оборудование может различаться.

Например, для вируса гепатита C уровень вирусной нагрузки до 600 000 МЕ/мл считается низким, 800 000 МЕ/мл – средним, а 1 000 000 МЕ/мл – высоким.

В некоторых медицинских учреждениях для удобства представления результатов количественного анализа ПЦР используют записи в формате: 3*10^3 МЕ/мл, 4*10^4 МЕ/мл, 5*10^5 МЕ/мл и так далее. Чтобы понять, какое значение имеется в виду, достаточно выполнить умножение.

Сколько стоит сдать ПЦР?

Цены на медицинские услуги могут значительно варьироваться в зависимости от региона и типа клиники. Обследование в государственных учреждениях обычно обходится дешевле, тогда как частные диагностические центры предлагают более комфортные условия и быстрее предоставляют результаты.

Средняя стоимость качественного ПЦР-анализа на выявление основных заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), таких как хламидиоз, гонорея, микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз, а также герпес, гепатит, папилломавирусы различных типов, ВИЧ, цитомегаловирус и хеликобактер, колеблется от 250 до 600 рублей за каждого отдельного возбудителя.

Количественный анализ, как правило, стоит дороже качественного, особенно в случае с ВИЧ и гепатитом. Например, москвичи с диагнозом гепатит могут узнать свою вирусную нагрузку за сумму от 3500 до 6000 рублей, а ВИЧ-положительные пациенты – за 11000-13000 рублей.

Чтобы снизить затраты на ПЦР-диагностику, рекомендуется заказывать комплексные пакеты анализов, охватывающие все наиболее распространенные ЗППП, системные или респираторные инфекции. Это позволит существенно сэкономить и повысить уверенность в своем здоровье. Средняя стоимость таких пакетов или «скринингов» составляет от 1500 до 2500 рублей.

Рекомендуется обращаться в муниципальные лаборатории или частные медицинские центры с хорошей репутацией. Мы не будем упоминать конкретные учреждения, чтобы избежать рекламы, но вы легко сможете их найти, введя в поисковую строку запрос «сдать ПЦР анализ». Важно подчеркнуть значимость своевременной диагностики инфекций: если у вас есть подозрения на заражение или вы уже чувствуете недомогание, не стоит надеяться на «авось» и заниматься самолечением – лучше как можно скорее обратиться к врачу. Берегите себя и будьте здоровы!

[Видео] Врач-дерматовенеролог, уролог Ленкин Сергей Геннадьевич расскажет о всех нюансах ПЦР анализа:

Вопрос-ответ

Что входит в ПЦР 12 инфекций?

ПЦР 12 инфекций — это лабораторный тест, который позволяет одновременно выявлять ДНК или РНК 12 различных инфекционных агентов, включая вирусы, бактерии и грибы. Обычно в этот набор входят такие инфекции, как ВИЧ, гепатиты B и C, сифилис, хламидиоз, гонорея, микоплазмоз, уреаплазмоз, цитомегаловирус, вирус папилломы человека и другие. Тест помогает быстро и точно диагностировать инфекции, что важно для выбора эффективного лечения.

Какие инфекции покажет ПЦР?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) может выявлять различные инфекции, включая вирусные (например, ВИЧ, грипп, COVID-19, гепатиты), бактериальные (такие как туберкулез, хламидиоз, гонорея) и грибковые инфекции (например, кандидоз). Этот метод позволяет обнаруживать генетический материал патогенов с высокой чувствительностью и специфичностью.

Сколько стоит ПЦР-тест на 12 инфекций?

Средняя цена на услугу «анализ ПЦР на 12 инфекций» – 5879 руб. (от до 8745 руб.).

Как сдать анализ ПЦР на 12 инфекций?

После кольпоскопии, интравагинального УЗИ или полового контакта должно пройти 48 часов. Накануне исследования не применять местные лекарственные препараты и процедуры, исключить половой акт. При взятии соскоба из уретры не мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры.

Советы

СОВЕТ №1

Перед сдачей ПЦР анализа обязательно проконсультируйтесь с врачом. Он поможет определить, какие именно инфекции необходимо проверить, исходя из ваших симптомов и медицинской истории.

СОВЕТ №2

Убедитесь, что вы соблюдаете все рекомендации по подготовке к анализу. Это может включать воздержание от еды, питья или приема определенных медикаментов за несколько часов до процедуры.

СОВЕТ №3

Не забывайте о важности своевременной интерпретации результатов. Обсудите их с врачом, чтобы понять, какие шаги следует предпринять в случае положительного результата.

СОВЕТ №4

Если у вас есть риск заражения инфекциями, рекомендуется проходить ПЦР анализы регулярно. Это поможет выявить заболевания на ранней стадии и начать лечение как можно скорее.